GPP 良好的移液操作规范

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安装吸头

正确操作:微旋安装法—移液器套柄用力下压并小幅度旋转即可。

错误操作:用力敲击吸头

1) 吸头变形影响准确性
2) 套柄在强力摩擦下磨损影响密封从而影响准确性
3) 小量程移液器的套柄比较细,用力敲击可能会损坏套柄
安装不好吸头会带来高达5%的移液误差,甚至更高!

设定量程 

通常的量程:一般在 10% - 100% 量程范围内可以操作:

(1)移液范围选择在满量程的35%到100%时,可以保证最佳的准确性和重复性。选择合适的量程可以提高1%移液精度! 该移液器的最佳量程范围内可提高1%移液准确性!
(2)移液器量程设定原则:由大到小。当由小量程调节到大量程时,旋转调节旋钮到达超过所需量程1/3 圈处,然后回调到所需量程准确位置。正确的量程设定可以提高0.5%的移液准确性!

润洗吸头 

有些溶剂,比如浆液,含蛋白溶液,有机溶剂等,都有可能会残留液体薄膜在吸头内壁上,这样所得的错误值远大于规定的允许值。而使用该吸头继续进行移液时,薄膜会保持相当的恒定。因此要获得很好的移液精度,可以在安装新吸头后,用相同样品对吸头进行润洗。润洗吸头可提高0.5%的移液准确性!

吸头浸入的深度

吸头浸入深度非常关键。如果不适当,实际移液容积可能就不准确。 吸头浸入合适的深度进行吸液操作可提高1%的移液准确性

 


 
吸头的角度

很多人在吸取样品时为便于观察以 45°角持握移液器吸液。但事实上,这样的操作对准确性影响很大。吸头浸入角度同样重要,应保持移液器垂直或倾角20 度以内。 

1)移取接近或达到吸头的最大容积的样品时,移液器大角度倾斜很容易让液体溜到移液器的套柄里面,污染甚至腐蚀移液器的活塞,同时也容易造成样品的交叉污染;
2)移液器的大角度倾斜同时也会让吸头外壁与液体的接触面增大,这样吸头离开液面时外壁残留的液体也更多,

很容易在排液时随吸头内的液体一起离开吸头,从而降低移液的精度,而这些残留的液体对于微小量程(如2ul和10ul)的移液器而言,其对精度的破坏很可能是致命的!

 

吸液注意事项 

吸液后保持吸头浸入液面最少1秒,尤其是大量程的移液器
将吸头平缓移开液面,对吸取大容量样品或者高粘度样品尤为重要

吸液速度的影响

过快的吸液速度

1) 样品形成漩涡,产生气泡
2) 样品液进入套柄,对活塞和密封圈造成损伤
3) 带入气雾造成样品交叉污染

在移液过程中各操作步骤是否保持一致将对重复性产生很大影响。 

1)    应保持吸液和排液节奏的一致性。 
2)    按压或释放按钮的速度平稳一致。 
3)    到达第一停止点的用力应保持一致。 
4)    吸头的浸入深度保持一致。 

反向模式移液

针对高粘度样品可采用反向模式移液,即同常规移液模式相反的流程(第二停止点吸液,第一停止点排液) 
● 适用于高粘度样品
 适用于高密度/低密度样品

高温消毒 

对于RAININ 移液器,可经高温消毒的部分是套柄、套柄耦合器、吸头推出器以及活塞组件:121 摄氏度,1 个大气压,15-20 分钟。 
注意:移液器上半部分影响移液器移液精度(,请不要把这部分进行高温灭菌。 

避免接触酸性和腐蚀性物质 

● 在移取高浓度的酸性或强腐蚀性溶剂后,应拆卸移液器,然后清洗活塞(用蒸馏水或异丙醇)、套柄和密封部件。在完全干燥后,再重新安装好。
● 过度接触腐蚀性的气雾会腐蚀活塞,这样就会导致密封装置过早损坏甚至需要更换活塞。使用带滤芯的吸头可以有效的减少移液器内部零部件暴露在腐蚀气雾中的可能。

 

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